EASL2021：在研乙肝新藥ALG

靶向乙型肝炎病毒(HBV)衣殼組裝的步驟是治療慢性乙型肝炎的有效靶點，Ⅱ類衣殼組裝調節劑(CAMs)可誘導HBV核心蛋白(HBc)快速組裝成空衣殼，從而抑制HBVRNA的包裹和感染性HBV顆粒的形成。CAM還可以通過阻止病毒DNA從衣殼中的釋放來阻斷cccDNA的建立。

作為AligosTherapeutics公司推進多種結構多樣化衣殼組裝調節劑(CAMs)的努力的一部分，公司研究人員在近日舉辦的歐洲肝病學會年會上報道了ALG-000111，一種新型的II類CAM，在AAV-HBV小鼠模型中具有出色的抗病毒活性和療效。

采用定量聚合酶鏈反應(QPCR)檢測有無40%人血清的HepG2.117細胞中HBVDNA的抗病毒活性。優化的檢測方法被用來評估對幾個log的抑制作用以及去除化合物后抗病毒作用的持久性。研究人員還在HBV感染的原代人肝細胞中進行了活性研究，包括對HBVDNA的主要影響和對cccDNA建立的次要影響。使用生化猝滅分析、電子顯微鏡觀察和免疫熒光HBc染色進行進一步的表征。ADME的性質是在體外評估的，而體內的抗病毒效果是在AAV-HBV小鼠模型中評估的。

研究結果顯示，ALG-000111及其前藥ALG-000286對HepG2.117細胞的HBVDNA產生明顯的抑制作用，其EC50值分別為0.88/4.34nM和2.06/9.23nM。優化后的方法可測得EC99/EC99.9值分別為4.81/15.3nM和10.4/39.7nM。加入40%的人血清后，抗病毒活性出現7倍的中度變化。反彈試驗顯示抗病毒活性有顯著的保留，在化合物去除后10天可以觀察到強烈的抑制作用。

ALG-000111對乙型肝炎病毒感染的原代肝細胞也有明顯的抗病毒活性，對HBVDNA的EC50/EC90值為0.98/3.22nM。此外，cccDNA的形成被阻斷，表現為分泌的HBsAg和細胞內的HBVRNA明顯減少(EC50/EC90值分別為41.7/651nM和34.0/189nM)。

在生化猝滅實驗和電鏡下發現ALG-000111誘導空衣殼形成。免疫熒光成像顯示有胞漿內HBc聚集的趨勢。ALG-000111在SGF/SIF、肝微粒體和肝細胞中穩定。該化合物顯示出低CYP450介導的藥物相互作用潛力和高透過性的Caco-2單層。前藥ALG-000286在AAV-HBV小鼠模型中的評價結果顯示，口服30mg/kgBID4周后，HBVDNA明顯下降，平均最大下降3.7log10IU/mL。

綜上，研究認為，由于ALG-000286在細胞檢測和AAV-HBV小鼠模型中具有亞納摩爾活性和HBVDNA的深度敲除，是一種有前途的II類CAM候選藥物，值得進一步開發。（更多肝病新藥研究信息敬請關注“肝臟時間”微信公眾號）！