期刊導(dǎo)讀：向HBeAg陰性慢性HBV感染的轉(zhuǎn)化與cccDNA轉(zhuǎn)錄活性的降低相關(guān)

編者按：以往有研究證實(shí)HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換時HBVDNA顯著下降3-5log，常伴隨著cccDNA下降1-2log。然而為何HBeAg陰性慢乙肝伴隨著高病毒復(fù)制，而HBeAg陰性慢性HBV感染的HBVDNA滴度低或處于檢測不到的情況仍值得進(jìn)一步探究。

最近JournalofHepatology上發(fā)表的最新研究確定了HBeAg陰性人群不同疾病階段病毒生命周期發(fā)生病毒抑制的機(jī)制，發(fā)現(xiàn)HBeAg陰性人群的cccDNA水平與NA治療的患者相似，而HBeAg陰性慢性HBV感染者（ENCI）cccDNA轉(zhuǎn)錄活性顯著低于HBeAg陰性慢乙肝（ENCHB）患者，這可能是ENCI患者病毒滴度低或低于檢測下限的主要原因。

研究方法

為了確定患者轉(zhuǎn)換為HBeAg陰性慢性HBV感染時病毒生命周期中哪些步驟發(fā)揮作用，該研究對68例處于不同疾病階段的慢乙肝人群活檢組織中的cccDNA、前基因組RNA（pgRNA）、總HBVRNA和HBVDNA復(fù)制中間產(chǎn)物（repDNA）進(jìn)行了定量檢測。

患者基線

研究共包括13例HBeAg陽性人群（未細(xì)分為HBeAg陽性慢乙肝患者和HBeAg陽性慢性HBV感染者）、30例HBeAg陰性慢乙肝（ENCHB）、18例HBeAg陰性慢性HBV感染（ENCI）和7例接受NA治療的患者。大多數(shù)患者為HBV基因D型。

其中HBeAg陽性人群HBVDNA均處于高滴度。7例接受NA治療的患者中5例為HBeAg陰性，所有患者HBVDNA均低于檢測下限。ENCHB和ENCI是根據(jù)2017年EASL指南進(jìn)行劃分，ENCHB的ALT水平持續(xù)或間歇性升高，HBVDNA>2000IU/mL，ENCI的ALT正常，HBVDNA≤2000IU/mL。

研究結(jié)果

1.NA的病毒抑制作用對cccDNA水平的影響有限

HBVDNA載量從HBeAg陽性人群的中位~1.7x108IU/mL降低至ENCHB的~2x105IU/mL（與HBeAg陽性相比低2.9log），再到ENCI的~1.5x102IU/mL（與HBeAg陽性相比低6log），NA治療組HBVDNA均低于檢測下限。

而HBeAg陽性人群的中位cccDNA為0.9拷貝/cell，ENCHB組為0.06拷貝/cell（與HBeAg陽性相比低1.2log），ENCI組為0.015拷貝/cell（與HBeAg陽性相比低1.8log），NA治療組cccDNA約為0.03拷貝/cell，與ENCI和ENCHB組的cccDNA水平相似，均高于檢測下限。該結(jié)果與以往研究相似，即NA的病毒抑制作用對cccDNA水平僅是有限的影響。

2.HBeAg陰性慢性HBV感染者cccDNA轉(zhuǎn)錄活性顯著更低

以pgRNA/cccDNA衡量cccDNA轉(zhuǎn)錄活性。其中HBeAg陽性組最高，中位值為286拷貝/cccDNA。HBeAg陰性人群的pgRNA活性整體較低，其中ENCHB組和NA治療組的cccDNA轉(zhuǎn)錄活性沒有顯著性差異（中位數(shù)分別為51和105拷貝/cccDNA）。與ENCHB相比，ENCI組的cccDNA轉(zhuǎn)錄活性（1.1拷貝/cccDNA）降低了46倍。

該分析顯示，與其他組相比，ENCI組的HBVRNA總量也顯著更少。且cccDNA轉(zhuǎn)錄活性與病毒基因型無關(guān)。

HBeAg陽性組中位repDNA/cell最高。ENCHB組中repDNA/cell降低了約2.6log；ENCI組中進(jìn)一步降低了2log，與NA治療組repDNA/cell相似。

而該研究還測定了不同疾病階段的病毒復(fù)制效率，即repDNA/pgRNA值。與其他組相比，NA組的病毒復(fù)制效率最低（即低1.6-1.9log），但ENCI組的病毒復(fù)制效率未降低，這表明pgRNA下游的病毒復(fù)制未減弱不影響ENCI整體的病毒復(fù)制的低水平。

3.部分HBeAg陰性慢乙肝患者pgRNA下游病毒復(fù)制效率低

將ENCHB患者分為高復(fù)制效率組（ENCHB-HR）和低復(fù)制效率組（ENCHB-LR）。其中ENCHB-HR的復(fù)制效率與HBeAg陽性人群一樣高，而ENCHB-LR的復(fù)制效率與NA治療組相當(dāng)，這表明在這類ENCHB患者中，pgRNA下游的復(fù)制受到非常強(qiáng)烈的抑制。

然而，這些患者的cccDNA轉(zhuǎn)錄活性與ENCHB-HR患者相比并沒有降低。

與ENCHB-HR患者相比，ENCHB-LR患者repDNA/cell和cccDNA/cell分別低224倍和8倍，并且與ENCI和NA治療組一樣低。ENCHB-LR患者的中位病毒載量比ENCHB-HR患者低約27倍。

這些結(jié)果揭示了ENCHB患者中存在抑制pgRNA下游HBVDNA復(fù)制的一個或多個步驟，并且提示ENCHB狀態(tài)實(shí)際上結(jié)合了兩個不同的階段，這兩個階段在控制病毒復(fù)制的潛在分子機(jī)制方面是不同的。

肝霖君有話說

HBeAg陰性慢性HBV感染者（ENCI）（中國指南稱為非活動性HBsAg攜帶者）病毒載量低或檢測不到，本研究發(fā)現(xiàn)主要是cccDNA轉(zhuǎn)錄活性降低導(dǎo)致，雖然pgRNA下游的病毒復(fù)制未減弱，但并未影響整體病毒的控制。

對乙肝自然史以及抗病毒治療中病毒生命周期的各個環(huán)節(jié)了解的越清晰，越有利于對于乙肝治愈優(yōu)化策略和新藥研發(fā)的探索。

參考文獻(xiàn)：

SuslovA,MeierMA,KettererS,etal.TransitiontoHBeAg-negativechronichepatitisBvirusinfectionisassociatedwithreducedcccDNAtranscriptionalactivity[J].JHepatol,2020.