EASL2020：研究發(fā)現(xiàn)一種新CAMs不誘導(dǎo)明顯的HBcAg細(xì)胞質(zhì)滯留

衣殼組裝調(diào)節(jié)劑(CAMs)可誘導(dǎo)HBV衣殼空殼化/異常化目前正被開(kāi)發(fā)用于慢乙肝治療。體外不同效價(jià)的衣殼組裝調(diào)節(jié)劑(CAMs)是否會(huì)改變體內(nèi)HBV核心蛋白(HBcAg)顆粒和非顆粒形式的正常細(xì)胞內(nèi)分布，以及這種改變假設(shè)是否具有毒性和/或免疫調(diào)節(jié)/免疫病理學(xué)后果尚不清楚。

為了研究評(píng)估上述問(wèn)題，意大利研究人員利用具有免疫功能的轉(zhuǎn)基因小鼠中進(jìn)行相關(guān)研究，該種小鼠對(duì)乙型肝炎病毒具有免疫耐受性，肝臟中病毒以高水平無(wú)限復(fù)制并表現(xiàn)穩(wěn)定，終身病毒血癥可維持在10^8genomes/ml水平。

使用在體外具有不同效力譜的三種專有衣殼組裝調(diào)節(jié)劑(CAMs)(稱為M-1103、M-1407和M-1428)和first-in-class的CAM(稱為NVR3-778)，在HBV復(fù)制轉(zhuǎn)基因小鼠中，進(jìn)行以下指標(biāo)評(píng)估：1)相對(duì)抗病毒效力，ii)衣殼/核心蛋白分布，iii)直接或免疫介導(dǎo)的肝細(xì)胞毒性和iv)免疫調(diào)節(jié)潛能。

在HepAD38細(xì)胞和乙型肝炎病毒感染HepG2-NTCP細(xì)胞進(jìn)行的EC50/EC90評(píng)估中，M-1103和M-1407的體外效力分別是NVR3-778的～30和～100倍；而皮摩爾活性的M-1428效力是NVR3-778的500倍。在體內(nèi)也觀察到了與NVR3-778相似的效價(jià)比，M-1428在50mg/kgqd劑量下僅用3d就能定量清除轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟中的HBV復(fù)制中間產(chǎn)物(同時(shí)血清HBVDNA、HBVRNA和HBeAg也有降低)。

時(shí)間和劑量依賴實(shí)驗(yàn)表明，所測(cè)試的衣殼組裝調(diào)節(jié)劑(CAMs)沒(méi)有引起直接肝臟損傷。

然而，令人驚訝的是，NVR3-778、M-1103和M-1407誘導(dǎo)了HBcAg的顯著細(xì)胞質(zhì)滯留，而效力更強(qiáng)的M-1428和結(jié)構(gòu)相關(guān)的類似物則沒(méi)有。

值得注意的是，后一種化合物不會(huì)使肝細(xì)胞對(duì)HBcAg特異性效應(yīng)分子CD8T細(xì)胞介導(dǎo)的殺傷敏感，也不會(huì)干擾最近描述的基于IL-2的治療策略(Nature574:200,2019)，該策略能夠在同一動(dòng)物模型中逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耐受。

綜上研究結(jié)果表明，在體外抗病毒效力具有高度多樣性的衣殼組裝調(diào)節(jié)劑(CAMs)在體內(nèi)的表現(xiàn)相當(dāng)不可預(yù)測(cè)，因?yàn)樗鼈兙哂斜Ａ舭麧{HBcAg的內(nèi)在能力，其次，影響衣殼組裝調(diào)節(jié)劑(CAMs)暴露的HBV感染肝細(xì)胞與適應(yīng)性免疫反應(yīng)的相互作用。（更多肝病新藥研究信息敬請(qǐng)關(guān)注“肝臟時(shí)間”微信公眾號(hào)）！