EASL2021：siRNA療法藥物ALG

目前的慢性乙型肝炎(CHB)標(biāo)準(zhǔn)治療未能降低獲得“功能性治愈”所需的HBsAg。HBVsiRNA療法已被證明能有效降低慢性乙型肝炎患者的HBsAg。在一項(xiàng)項(xiàng)研究中，研究人員對(duì)不同的HBVsiRNA序列應(yīng)用了多種穩(wěn)定化學(xué)方法，包括獨(dú)特的末端封端，在AAV-HBV小鼠模型血清中測(cè)得HBsAg的敲低深度和持續(xù)時(shí)間方面取得了顯著改善。

最終，研究人員選擇了ALG-125755，一種利用這些化學(xué)物質(zhì)的siRNA療法ALG-125903的GalNAc共軛形式，被選擇用于進(jìn)一步開發(fā)。在近日舉辦的歐洲肝病學(xué)會(huì)年會(huì)上，研究人員報(bào)告了在細(xì)胞核動(dòng)物模型中測(cè)試該藥物的研究結(jié)果。

在HepG2.2.15細(xì)胞（一種常用的基因型DHBV細(xì)胞模型），包含整合部分HBV基因組的PLC/PRF/5細(xì)胞和原代人類肝細(xì)胞(PHH)活HBV感染模型中分析了HBVsiRNA對(duì)HBsAg釋放的影響。

使用Lipofectamine?RNAiMAX轉(zhuǎn)染未結(jié)合的siRNA。對(duì)于PHH細(xì)胞，在siRNA轉(zhuǎn)染前4天以200MOI(ge)感染HBV。通過ELISA定量檢測(cè)分泌的HBsAg。在AAV-HBV小鼠模型中，每5天將與GalNAc結(jié)合的HBVsiRNA皮下(SC)給藥并收集血液，用于HBsAg和ALT評(píng)估。

研究結(jié)果顯示，ALG-125755針對(duì)乙型肝炎病毒基因組的一個(gè)高度保守的區(qū)域，在小乙型肝炎表面抗原開放閱讀框中，可以切割4個(gè)乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)錄本，包括2.4kb和2.1kb的乙型肝炎表面抗原編碼轉(zhuǎn)錄本。測(cè)序結(jié)果表明，與乙肝病毒基因型A-J的同源性為≥99%。

在HepG2.2.15中，ALG-125903對(duì)乙型肝炎表面抗原釋放的抑制作用EC50值為24pm。該序列在HBV感染的PHH和PLC/PRF/5細(xì)胞中也顯示出相似的效力。單次SC劑量為5mg/kg的ALG-125755可使AAV-HBV小鼠血清中HBsAg降低1.5log10IU/mL，比未優(yōu)化親本高0.5log10IU/mL。

ALG-125918在另一個(gè)HBVsiRNA的反義鏈上含有一個(gè)新的末端帽，在單次SC劑量為5mg/kg后，其最大HBsAg減少率比其親本提高了0.5log10IU/ml。重要的是，這種修飾顯著提高了HBsAg敲除的持久性，在AAV-HBV小鼠中，這種敲除在單劑用藥后穩(wěn)定持續(xù)了90天。

綜上，多個(gè)新型GalNAc偶聯(lián)HBVsiRNA序列包含獨(dú)特的優(yōu)化穩(wěn)定模式和新型化學(xué)物質(zhì)，在AAV-HBV小鼠模型中顯示出顯著且持久的HBsAg敲低。其中，已選擇ALG-125755進(jìn)行進(jìn)一步開發(fā)。（更多肝病新藥研究信息敬請(qǐng)關(guān)注“肝臟時(shí)間”微信公眾號(hào)）！